JSAN JR Swiftのアプリケーション

JSAN JR Swiftセルソーター

マルチカラー解析/ソーティング
多様な細胞集団を含む末梢血細胞から、特定の細胞を取り出 すソーティング技術は近年、ますます重要視されてきています。
そこで、マウス脾臓細胞・ヒト末梢血に対して5 種類の抗体とPI を用いてJSAN JR Swiftでマルチカラー解析を行いました。
FL-1 : FITC-CD4
FL-2 : PE-NK-1.1
FL-3 : PI
FL-4 : PE-Cy7-CD45R(B220)
FL-5 : APC-CD3
FL-6 : APC-eFluor780-CD8a
下図はマウス(C57BL/6) 脾臓細胞を5 種類の抗体とPI を用いて染色し、PI 陰性分画、脾臓分画にゲーティングし、次に、CD3 陽性細胞とCD3 陰性細胞にそれぞれゲーティングし展開しました。
GFP GFP GFP GFP
PI 陰性分画にゲーティング 脾臓分画にゲーティング      ↓ CD3 陽性細胞を展開し、
CD4/CD8 の発現を測定
GFP
CD3 陰性細胞を展開し、NK-1.1 の発現を測定

下図は上記と同じ細胞を用いて、PI 陰性分画、脾臓分画にゲーティングし、CD4 陽性のヘルパーT 細胞とCD8a 陽性の細胞障害性T 細胞をそれぞれJSAN JR Swift でソーティングしました。その結果、両者共にほぼ100% の純度でソーティングできました。
GFP GFP GFP GFP
PI 陰性分画にゲーティング 脾臓分画にゲーティング      ↓ ソーティング後のCD4 陽性細胞
GFP
ソーティング後のCD8a 陽性細胞